iCell 0.25%胰蛋白酶（含0.02%EDTA）

产品说明

在组织细胞的体外培养和原代细胞培养中的组织细胞分散（将组织块制备成单个细胞悬液）以及传代细胞培养中，贴壁生长细胞的消化分散均要使用组织细胞消化液。常用的消化液为胰蛋白酶，EDTA等，其功能主要是使细胞间的蛋白质（如细胞外基质）水解，使组织或贴壁细胞分散成单个细胞，制成细胞悬液用于进一步的实验。

iCell生产的胰蛋白酶消化液(Trypsin Solution)含0.25%胰酶，溶于无钙镁平衡盐溶液中，经过滤除菌，可以直接用于培养细胞和组织的消化。本产品具有方便快速、稳定安全、细胞状态好等特点。通常室温消化2分钟左右就可以消化下大多数贴壁细胞。

使用方法

1. 贴壁细胞的消化

a) 吸去培养液，用无菌的PBS、Hanks液或无血清培养液洗涤细胞一次，以去除残余的血清。

b) 加入少量胰蛋白酶消化液，盖过细胞即可，室温放置1-2分钟。不同的细胞消化时间有所不同，对于贴壁牢固的细胞可适当延长消化时间。

c) 显微镜下观察，细胞明显收缩，具体以细胞消化到相互分离但未脱落，轻敲几下可以下来为准，严禁消化到细胞完全漂浮，此时吸除消化液。加入含10%血清的细胞培养液，吹打下细胞，即可直接用于后续实验。

d) 如果发现消化不足，可加入胰蛋白酶消化液重新消化。

e) 如果发现细胞消化时间过长，未及吹打细胞，细胞已经有部分直接从培养器皿底部脱落，直接用胰酶细胞培养液把细胞全部吹打下来。1000RPM条件下离心3-5min，沉淀细胞，尽量去除胰酶细胞消化液后，加入含血清的完全培养液重新悬浮细胞，即可用于后续实验。

2. 组织的消化

不同的组织需要消化的时间相差很大，通常以消化后可以充分打散组织为宜。